Auftragsort Isoelektrische Fokussierung

Uns erreichte folgende Frage:

Ich habe die Position des Gels umgekehrt…In diesem Experiment lief alles richtig. Die Banden waren extrem klar und die Banden vom Marker waren gerade…Ich möchte Sie fragen, ob das erhaltene Ergebnis der Effekt der Proteinmigration von höheren zu niedrigeren Ampholytkonzentrationen ist.

Der SERVA TechServ antwortete:

In der IEF spielt es keine Rolle, wo Sie Ihre Probe auftragen. Das Protein läuft immer zum isoelektrischen Punkt. Der Hauptfaktor ist die Mobilität und Löslichkeit des Proteins. Diese werden von vielen Faktoren beeinflusst, z.B. Puffer, pH-Wert, Hydrathülle und vieles mehr. Vielleicht wandert Ihr Protein besser, weil am neuen Auftragspunkt der pH-Wert / die Ampholyte besser geeignet sind und das Protein daher besser in das Gel einwandert und eine bessere Mobilität aufweist…